產品概述

大鼠MIS/AMH（繆勒管抑制物質/抗繆勒管激素）ELISA試劑盒是一種用于定量檢測大鼠血清、血漿或細胞培養上清液中MIS/AMH含量的固相酶聯免疫吸附測定試劑盒。本試劑盒采用雙抗體夾心法原理，具有高靈敏度、高特異性和良好的重復性，操作簡便，適合科研使用。

檢測原理

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法。在微孔板上預包被有大鼠MIS/AMH特異性捕獲抗體。樣品或標準品中的大鼠MIS/AMH會與捕獲抗體結合。洗滌后，加入生物素標記的檢測抗體，形成“捕獲抗體-抗原-檢測抗體”復合物。再次洗滌后，加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的鏈霉親和素。最后加入底物TMB進行顯色。顏色的深淺與樣品中大鼠MIS/AMH的濃度成正比。通過酶標儀測定吸光度值，繪制標準曲線，即可計算出樣品中MIS/AMH的濃度。

主要組分（以96孔板規格為例）

1. 預包被微孔板：1塊（96孔，可拆卸）
2. 大鼠MIS/AMH標準品：凍干粉或液體，濃度梯度已知
3. 標準品/樣品稀釋液：1瓶
4. 生物素標記的檢測抗體：1瓶
5. HRP標記的鏈霉親和素：1瓶
6. 濃縮洗滌液（20X）：1瓶
7. TMB底物溶液：1瓶
8. 終止液：1瓶
9. 封板膜：若干
10. 產品說明書：1份

注意： 具體組分與濃度請以收到試劑盒內的實際清單為準。部分組分需根據說明書要求進行稀釋或復溶。

樣品收集與處理

• 血清： 使用不含抗凝劑的采血管收集血液，室溫靜置30分鐘，待其自然凝固后，1000×g離心15分鐘，小心吸取上清液（血清）進行檢測或分裝凍存于-20℃以下。避免反復凍融。
• 血漿： 使用EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑。采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘，收集上清液（血漿）。
• 細胞培養上清液： 直接離心取上清檢測。若樣品中待測物濃度過高，請用標準品/樣品稀釋液進行適當稀釋。

操作步驟（簡要流程）

1. 準備： 將所有試劑和樣品恢復至室溫（約20-25℃）。配制好所需濃度的標準品，并用稀釋液按預定倍數稀釋待測樣品。用去離子水或蒸餾水將20X濃縮洗滌液稀釋成1X工作液。
2. 加樣： 分別設置空白孔、標準品孔和樣品孔。向相應孔中加入100μL標準品或已稀釋的樣品。輕輕混勻，貼上封板膜，37℃孵育90分鐘。
3. 加檢測抗體： 棄去孔內液體，每孔加入350μL 1X洗滌液，靜置30秒后棄去，在吸水紙上拍干。重復洗滌3次。每孔加入100μL生物素標記的檢測抗體工作液。貼上新的封板膜，37℃孵育60分鐘。
4. 加酶結合物： 重復步驟3的洗滌過程。每孔加入100μL HRP標記的鏈霉親和素工作液。貼上封板膜，37℃避光孵育30分鐘。
5. 顯色： 重復洗滌步驟5次。每孔加入90μL TMB底物溶液，37℃避光孵育15-20分鐘。密切觀察顏色變化。
6. 終止與測定： 每孔加入50μL終止液，此時藍色立即轉為黃色。在30分鐘內，用酶標儀測定各孔在450nm波長處的吸光度（OD值），建議使用雙波長測定，校正波長設為630nm。

結果計算

1. 計算每個標準品和樣品的平均OD值，減去空白孔的平均OD值（若有）。
2. 以標準品的濃度為橫坐標（X軸），OD值為縱坐標（Y軸），在坐標紙上或使用軟件繪制標準曲線。推薦使用四參數邏輯（4-PL）曲線擬合以獲得最佳結果。
3. 根據樣品的OD值，從標準曲線上查出對應的濃度，再乘以樣品稀釋倍數，即為樣品中大鼠MIS/AMH的實際濃度。

注意事項

1. 本試劑盒僅供科研使用，不得用于臨床診斷。
2. 不同批號的試劑盒組分不可混用。
3. 請嚴格按照說明書操作，孵育時間、溫度、洗滌次數均對結果有影響。
4. 避免TMB底物接觸氧化劑和金屬物。終止液為酸性溶液，操作時請小心。
5. 樣品應清澈，溶血、高脂或嚴重污染的樣品可能影響檢測結果。
6. 所有樣品、廢棄物均應視為潛在生物危害物進行處理。

保存條件與有效期

未使用的試劑盒應儲存于2-8℃。部分液體組分（如酶結合物、檢測抗體）可根據說明書建議分裝凍存于-20℃以下以延長保存時間。避免反復凍融。有效期通常為12個月，具體日期見外包裝標簽。

供應信息

本品可通過中國環保設備展覽網等平臺商機板塊查詢供應商信息。具體價格、現貨/訂貨狀態、發貨方式等請直接咨詢相關供應商。

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聲明： 本說明書內容基于通用ELISA原理及典型操作編寫，具體操作請務必以您所購試劑盒內附的官方說明書為準。